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        D-熒光素鉀鹽 D-熒光素鉀鹽

        D-熒光素鉀鹽

        CAS號(hào) 115144-35-9
        規(guī)格 1克
        純度 98%
        貨號(hào) luc001
        貨期 現(xiàn)貨
        品牌 sciencelight
        庫(kù)存 100g
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        參考價(jià): ¥6000.00 元/克
        貨號(hào) 品牌 純度 規(guī)格 參考價(jià) 貨期
        luc001 sciencelight 98% 1克 ¥6000.00元/克 現(xiàn)貨

        產(chǎn)品詳情

        詳細(xì)信息(中文):
        發(fā)光原理
        哺乳動(dòng)物生物發(fā)光,一般是將Firefly luciferase基因(由554個(gè)氨基酸構(gòu)成,約50KD)即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,當(dāng)細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化時(shí), 熒光素酶也會(huì)得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)。基因、細(xì)胞和活體動(dòng)物都可被熒光素酶基因標(biāo)記。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后,當(dāng)外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(D-luciferin,potassium salt,以下均簡(jiǎn)稱(chēng)熒光素),即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長(zhǎng)在540-600nm。這種酶在ATP,氧存在的條件下,催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會(huì)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象,并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān)。

        結(jié)構(gòu)與性能
        熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),生成氧化熒光素(oxyluciferin),并產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的,約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個(gè)小時(shí),只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶。

        (1) 熒光素不會(huì)影響動(dòng)物的正常生理功能。
        (2) 熒光素是280道爾頓的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障。
        (3) 熒光素在體內(nèi)擴(kuò)散速度快,可通過(guò)腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)。腹腔注射擴(kuò)散較慢,持續(xù)發(fā)光長(zhǎng)。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開(kāi)始發(fā)光,10min后強(qiáng)度達(dá)到穩(wěn)定的最高點(diǎn),在最高點(diǎn)持續(xù)約20~30 min后開(kāi)始衰減,約3h后熒光素排除,發(fā)光全部消失,最佳檢測(cè)時(shí)間是在注射后15~35min之間;若進(jìn)行熒光素靜脈注射,擴(kuò)散快,但發(fā)光持續(xù)時(shí)間很短。科研人員根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg,即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。
        (4) 觀察時(shí)間的間隔沒(méi)有最短限制,只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動(dòng)物體內(nèi)有一定的代謝過(guò)程,但是上一次底物的殘留曲線可以知道,可以控制對(duì)下一次觀察結(jié)果的影響。

        儲(chǔ)存與運(yùn)輸
        一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,溶解配制后放在4℃冰箱,短期運(yùn)輸放在4℃環(huán)境。

        應(yīng)用領(lǐng)域
        腫瘤,干細(xì)胞,藥物開(kāi)發(fā),基因治療,轉(zhuǎn)基因小鼠,免疫學(xué)等等。

        詳細(xì)信息(英文):
        Protocol 1: In Vitro Imaging of MDA-MB-231-luc and HCT116-Luc cells

        Materials needed:
        MDA-MB-231-luc cells (1 T175 flask)
        HCT116-Luc (1 T75 flask)
        Trypsin/EDTA
        D-Luciferin Firefly, potassium salt(Sciencelight, Catalog# luc001), 1.0 g /vial,
        Sterile water
        Complete media for each cell line
        96 well black plates (Costar)
        Procedure:
        A. Luciferin Preparation
        1. Prepare a 200X luciferin stock solution (30 mg/ml) in sterile water. Mix gently by inversion until luciferin is completely dissolved. Use immediately, or aliquot and freeze at -20?C for future use.
        * Note: Reconstitute the quantity of D-Luciferin necessary for an individual experiment.
        2. Prepare 2X luciferin (300ug/ml) in complete media. Quick thaw 200X stock solution and dilute 1:100 in complete media (2X solution)
        * Note: This working solution should be prepared fresh for each experiment.
        B. Cell Preparation and Serial Dilution
        1. Trypsinize a flask and resuspend cells in a total of 10ml media.
        2. Count cells and adjust cell concentration to 100,000 cells/ml = 10,000 cells/100ul.
        3. Perform a serial dilution (1:2) in complete media as follows:
        a. Pipette 200 ul cells into well #1 (in duplicate).
        b. Add 100 ul media to wells #2-10 (in duplicate) using a multi-channel pipette.
        c. Perform 1:2 serial dilution by pipetting 100ul from well #1 to well #2 using a multi-channel pipette, mixing well, then taking 100 ul from well 2 to well 3. Continue dilution to well #10 and discard 100 ul from well #10 after mixing.
        C. Imaging Procedure
        1. Add 100 ul 2X luciferin to cells in well #1-10.
        2. Place plate of cells in the camera system on FOV15cm to view entire plate. Use the Plate Positioner or Alignment Grid to help position the plate.
        3. Approximately 2-3 minutes after the addition of luciferin, image plate at 1 minute, 10 bin.
        * Note: If using >10,000 cells in well #1, imaging time should de decreased.
        D. Data Analysis
        1. Apply grid ROI to image; measure photons/well.
        2. Export measurements from

        產(chǎn)品實(shí)物圖

        產(chǎn)品實(shí)物圖

        產(chǎn)品百科查看更多

        英文名 D-Luciferin potassium salt
        中文名 D-熒光素鉀鹽
        CAS號(hào) 115144-35-9 溶解性 ---
        分子量 280.32300 熔點(diǎn) ---
        密度 --- 沸點(diǎn) ---

        商家信息

        上海科遠(yuǎn)迪生物科技有限公司

        營(yíng)業(yè)執(zhí)照已審核 企業(yè)已認(rèn)證

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        • 公司類(lèi)型:貿(mào)易商
        • 成立時(shí)間:2007-10-31
        • 所在地區(qū):上海市市轄區(qū)
        • 注冊(cè)資本:10萬(wàn)元
        推薦供應(yīng)商

        產(chǎn)品:D-熒光素鉀鹽