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        人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫試劑盒人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫試劑盒人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫試劑盒人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫試劑盒

        人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫試劑盒

        CAS號 0-00-0
        規格 48T/96T
        純度 99
        貨號 DM01850
        貨期 ---
        品牌 DM
        庫存 ---
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        參考價: ¥1.00 元/克
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        產品詳情

        詳細信息(中文):


        實驗原理

        試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人 CD80 分子(CD80)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人 CD80 分子(CD80)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


        保存條件及有效期

        1.本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中人 CD80 分子(CD80)的含量;

        2.試劑盒保存:2-8℃;

        3.有效期:6個月。




        人CD80分子(CD80)ELISA試劑盒



        標本的采集及保存

        1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

        2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

        3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 (注:標本溶血會影響**檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。)





        人CD80分子(CD80)ELISA試劑盒

        標本的稀釋原則:首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。

        標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。 如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

        生物素標記抗體的稀釋原則:臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

        辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

















        操作步驟

        實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

        1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。 為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

        2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。

        3.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

        4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

        5.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

        6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

        7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應

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        商家信息

        上海篤瑪生物科技有限公司

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        • 成立時間:2015-03-24
        • 所在地區:上海市市轄區
        • 注冊資本:100萬元
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